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棘手,液相色谱仪出峰不佳及柱压高现象的处理
点击次数:52 发布时间:2019-08-26
  液相色谱是一类分离与分析技术,其特点是以液体作为流动相,固定相可以有多种形式,如纸、薄板和填充床等。在色谱技术发展的过程中.为了区分各种方法,根据固定相的形式产生了各自的命名,如纸色谱、薄层色谱和柱液相色谱。
  说起液相色谱仪,不免会想到一些使用过程中遇到的故障现象,比较常见的主要两点,出峰不佳及柱压高,那么具体问题具体分析,该如何彻底解决呢,具体如下:
  液相色谱仪出峰不佳,峰分叉:
  1、色谱柱被污染。
  2、柱头填料塌陷。处理对于*种情况,先用纯水反向冲洗柱子,然后换成甲醇冲洗,接着用甲醇+异丙醇(4+6)冲洗柱子(冲洗时间 的长短由样品污染的情况而定),再换成甲醇冲洗,然后用纯水冲洗,zui后甲醇冲洗正向冲洗柱子30分钟以上。如冲洗后依然出峰不佳 ,则考虑第二种情况。对于第二种情况,拧开柱头,检查柱填料是否硬结或塌陷。去除硬结部分(污染的填料),装入新填料,滴一滴甲 醇,填料下陷,再填,用与柱内径相同的顶端平滑的不锈钢杆压紧,再填平,滴甲醇,再压紧反复几次,直至装满填平。柱头用甲醇冲 洗干净,擦净柱外壁的填料,拧紧柱头,用纯甲醇冲洗30分钟以上。
  液相色谱仪柱压高原因:
  1、缓冲液盐分如(乙酸铵等)沉积于柱内。
  2、样品污染沉积。处理对于*种情况先用40~50℃的纯水,低速正向冲洗柱子,待柱压逐渐下降后,相应提高流速冲洗,柱压大幅 度下降后,用常温纯水冲洗,之后用纯甲醇冲洗柱子30分钟;对于第二种情况,由样品的沉积引起污染的C18柱,和纯水反向冲洗柱子, 然后换成甲醇冲洗,接着用甲醇+异丙醇(4+6)冲洗柱子(冲洗时间的长短由样品污染的情况而定),再用换成甲醇冲洗,然后用纯水冲洗 ,zui后甲醇冲洗正向冲洗柱子30分钟以上。
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